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如何維持微生物菌種的活力
雙擊自動滾屏 發布者:發酵罐生產企業江蘇元洲生物 發布時間:2019-1-19 閱讀:403

對已衰退的菌種(群體)進行純種分離和選擇性培養,使其中未衰退的個體獲得大量繁殖,重新成為純種群體的措施。狹義的復壯是一消極措施,一般指對已衰退的菌種進行復壯;廣義的復壯是一積極的措施,即在菌種的生產性狀未衰退前就不斷進行純種分離和生產性狀測定,以在群體中獲得生產性狀更好的自發突變株。

1、定義

菌種退化是指群體中退化細胞在數量上占一定比例后,所表現出群體性能變差的現象。因此,在已經退化的群體中,仍然有一定數量尚未退化的個體。
2、復壯的方法

純種分離法

在衰退菌種的細胞群中,一般還存在著仍保持原有典型形狀的個體。通過純種分離法,設法把這種細胞挑選出來即可達到復壯的效果。純種分離方法極多,大體可分為兩類,一類較粗放,可達到“菌落純”水平(pure culture in colony level);另一類較精細,可達到“菌株純”的水平(pure culture in strain level),現表解如下:

菌落純

平板表面涂布法

平板劃線分離法

瓊脂培養基澆注法

細胞純

用“分離小室”進行單細胞分離

用顯微操縱器進行單細胞分離

用菌絲尖端切割法進行單細胞分離

用激光鑷子技術從毛細管中分離

通過宿主體內復壯

對于因長期在人工培養基上移種傳代而衰退的病原菌,可接種到相應的昆蟲或動、植物宿體中,通過這種特殊的“選擇性培養基”一至多次選擇,就可從典型的病灶部位分離到恢復原始毒力的復壯菌株。例如,經長期人工培養的Bacillus thuringiensis會發生毒力減退和殺蟲效率降低等衰退現象。這時,就可將已衰退的菌株去感染菜青蟲的幼蟲,然后再從最早、最嚴重罹病的蟲體內重新分離出產毒菌株。

淘汰已衰退的個體

有人發現,若對S. microflavus “5406”農用抗生菌的分生孢子采用-10℃~-30℃的低溫處理5~7天,使其死亡率達到80%左右。結果會在抗低溫的存活個體中留下未退化的個體,從而達到了復壯的效果。

3、適用情況編輯一般情況下,對于生產企業,菌種管理都要求對菌種進行定期的分離純化,也就是說分離篩選一般都是在退化之前就進行的一中常規工作,是防止菌種退化或者生產育種而采取的一中積極措施。另外,在出現發酵水平較高和較低的情況下,也會進行菌種的分離篩選。前者的目的是期望從發酵液中分離出高產菌株,而后者則是期望從可能已經退化的種子中分離出尚未退化的菌株。

 

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